摘要:目的探討系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)的凋亡變化及凋亡相關(guān)因子的表達(dá)。方法密度梯度離心和貼壁篩選法分離培養(yǎng)SLE患者及健康人骨髓MSCs,末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記(TUNEL)法檢測細(xì)胞凋亡;流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞表面Fas、Bcl—2表達(dá)水平及Caspase 8活性;實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)檢測Fas、Bcl-2、Bax、Bcl—w、Caspase 8及凋亡細(xì)胞蛋白酶激活因子(Apaf)-1mRNA表達(dá)水平;免疫組織化學(xué)染色檢測胞質(zhì)細(xì)胞色素C表達(dá)水平;統(tǒng)計學(xué)采用Mann—Whitnev秩和檢驗。結(jié)果SLE患者BMSCs凋亡明顯高于健康對照組[(64±10)%和(14±9)%,U=0,P〈0.05];SLE患者BMSCs抗凋亡因子Bcl-2蛋白表達(dá)顯著低于健康對照組[(11±9)%和(56±18)%,U=0,P〈0.05],其mRNA表達(dá)水平同樣顯著低于健康對照(0.2±0.2和2.4±0.7,U=24,P〈0.05);SLE患者BMSCs胞質(zhì)中細(xì)胞色索C表達(dá)顯著增多[(56±21)%和(16+16)%,U=1,P〈O.05]。SLE患者BMSCs細(xì)胞內(nèi)Caspase 8活性增強[(49±14)%和(16±12)%,U=0,P〈0.05],但基因表達(dá)水平與健康對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(U=28,P〉O.05);SLE患者與健康對照組BMSCs均高表達(dá)Fas,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(U=19,P〉0.05)。結(jié)論SLE患者BMSCs凋亡增多,可能與Bcl-2表達(dá)減少、胞質(zhì)中細(xì)胞色素C表達(dá)增多和Caspase 8活性增強,從而激活內(nèi)源性及外源性凋亡途徑相關(guān)。
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