摘要：目的建立小鼠Thl7細(xì)胞體外培養(yǎng)方法并研究姜黃素對(duì)Thl7細(xì)胞分化、功能的影響及機(jī)制。方法分離、純化小鼠脾臟CD4^＋CD25-T細(xì)胞，培養(yǎng)體系內(nèi)加入抗CD3、抗CD28抗體活化，并加入轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF）-β、白細(xì)胞介素（IL）-6、IL-23、抗干擾素-1抗體、抗IL-2抗體等促進(jìn)Thl7細(xì)胞分化。培養(yǎng)的Thl7細(xì)胞分為對(duì)照組、姜黃素低劑量（5pμmol／L）及高劑量（25μmol／L）組、西羅莫司（100ng／m1）組。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Thl7細(xì)胞比例，熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）及蛋白印跡法檢測(cè)視黃酸相關(guān)孤兒受體（ROR）γt表達(dá)水平及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄活化因子（STAT）3磷酸化水平，最后檢測(cè)細(xì)胞IL-17A、IL-21mRNA相對(duì)表達(dá)量。采用t檢驗(yàn)、單因素方差分析對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。結(jié)果本方案可明顯促進(jìn)Thl7細(xì)胞分化。與對(duì)照組相比，姜黃素低組、高劑量組及西羅莫司組Thl7細(xì)胞比例明顯降低[分別為（54．1±3．4）％、（40．3±2．8）％、（25．8±2．3）％、（25．0±2．0）％，t值為6．15，12．63，12．97，P值均〈0．01]。姜黃素低劑量組、高劑量組及西羅奠司組RORγt的mRNA水平、蛋白水平、STAT3磷酸化水平以及IL-17A、IL-21mRNA水平均較對(duì)照組明顯降低[（IL-17AmRNA分別為0．81±0．05，0．61±0．05，0．58±0．05，1．01±0．11，t值為4．81，8．52，8．89，；IL-21mRNA分別為0．73±0．06，0．49±0．03，0．59±0．03，1｜12±0．11，t值為5．98，9．22，7．95；P值均〈0．01]，且姜黃素高劑量組IL-21mRNA水平較西羅莫司組降低（P〈0．05）。結(jié)論姜黃素體外可以抑制小鼠脾臟CD4^＋CD25^-T細(xì)胞向Thl7細(xì)胞分化，并抑制IL-17A、IL-21mRNA合成，其機(jī)制可能與抑制細(xì)胞內(nèi)孤兒受體RORγt表達(dá)及STAT3磷酸化有關(guān)。