摘要：【目的】為了研究Bp MYB4基因在冷脅迫反應(yīng)中的功能,對(duì)其進(jìn)行了白樺轉(zhuǎn)化試驗(yàn)?！痉椒ā坎捎枚縋CR技術(shù)對(duì)Bp MYB4基因在白樺的根、莖、葉、木質(zhì)部、芽、莖段等18個(gè)組織部位的表達(dá)模式進(jìn)行分析,然后克隆構(gòu)建PGWB2-Bp MYB4植物過(guò)表達(dá)載體,通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法進(jìn)行白樺合子胚的遺傳轉(zhuǎn)化,采用PCR和熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因白樺株系中Bp MYB4基因的相對(duì)表達(dá)量,最后采用分光光度計(jì)法對(duì)Bp MYB4轉(zhuǎn)基因白樺進(jìn)行了8項(xiàng)生理指標(biāo)的測(cè)定?！窘Y(jié)果】相對(duì)于芽的表達(dá)量,Bp MYB4基因在第3片葉的葉脈和第1片葉與第2片葉之間嫩莖的表達(dá)量最高;白樺的遺傳轉(zhuǎn)化總共獲得了13個(gè)過(guò)表達(dá)株系,且Bp MYB4基因已經(jīng)成功整合到白樺基因組上,定量結(jié)果發(fā)現(xiàn)MYB-8、MYB-11、MYB-12轉(zhuǎn)基因白樺中Bp MYB4基因的表達(dá)量相對(duì)于非轉(zhuǎn)基因?qū)φ罩晗?NT)上調(diào)幅度最大;在低溫脅迫下,過(guò)量表達(dá)Bp MYB4基因提高了白樺的超氧化物歧化酶(SOD)活性、過(guò)氧化物酶(POD)活性、花青素(OPC)含量、過(guò)氧化氫酶活性(CAT)、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量和脯氨酸(PRO)含量,同時(shí)降低了轉(zhuǎn)基因白樺的丙二醛(MDA)的含量?！窘Y(jié)論】Bp MYB4轉(zhuǎn)基因白樺在低溫脅迫下能夠產(chǎn)生具有保護(hù)作用的物質(zhì),具有一定的抵抗低溫的能力,因此,可以將其培育成抗凍優(yōu)選株系。