摘要:目的 探討神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素-3(NT-3)對(duì)體外機(jī)械性損傷的大鼠脊髓神經(jīng)元存活及其神經(jīng)突起生長(zhǎng)影響。方法 將體外培養(yǎng)的大鼠脊髓神經(jīng)元分為4組:正常組、對(duì)照組、20 ng/ml NT-3組和40 ng/ml NT-3組。培養(yǎng)4 d后,除正常組外,其余3組建立劃痕損傷模型。在劃痕損傷后,對(duì)照組不做處理,另外2組分別在培養(yǎng)液中加入20 ng/mlNT-3和40 ng/ml NT-3繼續(xù)培養(yǎng)。直至培養(yǎng)第6 d,應(yīng)用4%多聚甲醛固定4組細(xì)胞。固定后的細(xì)胞分別做轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的三磷酸脫氧鳥苷-生物素刻痕末端標(biāo)記(TUNEL)、微管相關(guān)蛋白2(MAP2)和生長(zhǎng)相關(guān)蛋白-43(GAP43)免疫熒光染色,檢測(cè)劃痕損傷的神經(jīng)元凋亡及其神經(jīng)突起生長(zhǎng)情況。結(jié)果 免疫熒光化學(xué)染色顯示,與對(duì)照組相比,應(yīng)用NT-3處理的2組可以顯著降低劃痕損傷后的脊髓神經(jīng)元凋亡率,并促進(jìn)其神經(jīng)突起生長(zhǎng)。尤其是40 ng/mlNT-3組的神經(jīng)元凋亡率最低,其神經(jīng)突起可穿過(guò)劃痕損傷邊界。結(jié)論 NT-3能夠促進(jìn)體外機(jī)械性損傷的大鼠脊髓神經(jīng)元存活及其神經(jīng)突起生長(zhǎng)。
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