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條件性骨細(xì)胞Tsc1基因敲除小鼠的初步研究

作者:胡樂(lè); 劉文; 張武鋦; 張?jiān)?/span> 南方醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院; 廣東廣州510515

摘要:目的構(gòu)建骨細(xì)胞Tsc1基因條件性敲除小鼠,并進(jìn)行表型鑒定,為進(jìn)一步研究TSC1在骨細(xì)胞中的作用奠定基礎(chǔ)。方法利用Tsc1^flox/flox和DMP1-Cre+轉(zhuǎn)基因小鼠進(jìn)行飼養(yǎng)和雜交;對(duì)繁殖產(chǎn)生的第1代小鼠進(jìn)行基因型鑒定,獲得Tsc1^flox/-DMP1-Cre^+,待其成年后,同Tsc1^flox/flox小鼠合籠,得到第2代小鼠,通過(guò)PCR鑒定出基因型為T(mén)sc1^flox/floxDMP1-Cre^+;此為本實(shí)驗(yàn)所需要構(gòu)建模型小鼠。應(yīng)用H-E染色、光學(xué)顯微鏡觀察10周齡小鼠骨細(xì)胞的改變。結(jié)果 2種轉(zhuǎn)基因小鼠繁殖產(chǎn)生的第2代小鼠基因型符合孟德?tīng)栠z傳定律,交配后獲得Tsc1^flox/floxDMP1-Cre^+小鼠。Tsc1基因通過(guò)Cre/loxP系統(tǒng)被成功敲除。結(jié)論該方法成功構(gòu)建可以在骨細(xì)胞條件性敲除Tsc1基因的小鼠,并進(jìn)行敲除后鑒定。

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