首頁 > 期刊 > 北方園藝 > 適于基因組測序的高質量桃線粒體DNA的高效提取方法 【正文】

適于基因組測序的高質量桃線粒體DNA的高效提取方法

作者:張穎; 武軍凱; 王海靜; 劉璐琪; 殷亞蕊; 張立彬 河北科技師范學院園藝科技學院; 河北秦皇島066000

摘要:高質量線粒體DNA(mtDNA)是線粒體基因組測序及序列分析的重要前提。為獲得高質量桃mtDNA,以‘21世紀’桃葉片為外植體,24℃完全避光條件下進行愈傷組織誘導及增殖。對獲得的愈傷組織進行勻漿化處理,結合差速離心、蔗糖襯墊和SDS裂解等方法提取并純化線粒體。結果表明:MS培養(yǎng)基添加3.0 mg·L-1 6-BA和1.0 mg·L-1 2,4-D可高效誘導并增殖桃葉片愈傷組織,誘導率可達到100%。熒光顯微鏡檢測顯示純化后的線粒體完整且具有活性。提取mtDNA的產率為13.10μg·g-1,無RNA和蛋白質等其它雜質污染。mtDNA電泳檢測條帶大小約為23 kb,無降解。特異性基因PCR檢測表明獲得的mtDNA不存在核DNA和葉綠體DNA污染,其純度可滿足后續(xù)分子生物學試驗及高通量基因組測序的要求。該研究建立了一個適合桃mtDNA快速高效提取方法,為后續(xù)相關分子生物學研究提供了參考依據。

注:因版權方要求,不能公開全文,如需全文,請咨詢雜志社。

北方園藝雜志

北方園藝雜志, 半月刊,本刊重視學術導向,堅持科學性、學術性、先進性、創(chuàng)新性,刊載內容涉及的欄目:農業(yè)信息技術、研究論文、研究簡報、設施園藝、園林花卉、信息廣角、資源·環(huán)境·生態(tài)、中草藥、食用菌、專題綜述、農業(yè)經濟、實用技術、新品種等。于1977年經新聞總署批準的正規(guī)刊物。

  • 北大期刊
  • 統(tǒng)計源期刊
  • 1-3個月審核

服務介紹LITERATURE

正規(guī)發(fā)表流程 全程指導

多年專注期刊服務,熟悉發(fā)表政策,投稿全程指導。因為專注所以專業(yè)。

保障正刊 雙刊號

推薦期刊保障正刊,評職認可,企業(yè)資質合規(guī)可查。

用戶信息嚴格保密

誠信服務,簽訂協(xié)議,嚴格保密用戶信息,提供正規(guī)票據。

不成功可退款

如果發(fā)表不成功可退款或轉刊。資金受第三方支付寶監(jiān)管,安全放心。

学术顾问

发表咨询 加急见刊 投稿咨询 润稿咨询